Langkah-langkah yang terlibat dalam mengisolasi dan mengevaluasi AAV3B-V04 dari pustaka AAV3B kombinatorial. Langkah 1: sublibrary A, B, dan C dengan mutasi pada VR-I, VR-IV, dan VR-VII, pertama-tama dirakit, digabungkan, dan kemudian dikemas. Langkah 2: Perpustakaan dikenai tiga putaran replikasi dalam kultur spheroid hepatokarsinoma manusia. AAV3B-V04 diisolasi dan dievaluasi secara in vitro dan in vivo. Langkah 3: Efisiensi transduksi diuji dalam mpPHH in vitro dan dalam hati tikus huFNRG in vivo. Langkah 4: Penghindaran titer NAb dalam IVIg dan sampel serum individu manusia dievaluasi secara in vitro. AAV, virus terkait adeno; IVIg, imunoglobulin intravena; mpPHH, hepatosit manusia primer yang dilalui tikus; NAb, antibodi penawar; VR, wilayah variabel. Kredit: Terapi Gen Manusia (2023). DOI: 10.1089/hum.2022.176
Sebuah studi baru mencirikan varian kapsid adeno-associated virus (AAV) 3B yang direkayasa secara biologis yang menunjukkan peningkatan transduksi ke sel hati manusia. Keuntungan lain dari kapsid AAV3B-V04 adalah sereaktivitasnya yang berkurang secara signifikan terhadap sampel serum manusia, seperti yang dilaporkan dalam penelitian yang diterbitkan dalam jurnal Human Gene Therapy.
Moanaro Biswas, dari Fakultas Kedokteran Universitas Indiana, dan rekan penulis, menghasilkan pustaka varian target kombinatorial AAV3B dan menggunakan evolusi terarah untuk mengisolasi varian penargetan hati yang ditingkatkan. Terapi gen hati dengan vektor AAV menawarkan potensi koreksi gangguan monogenik yang berumur panjang. Salah satu varian yang dihasilkan, AAV3B-V04, terbukti secara signifikan meningkatkan tropisme untuk hepatosit manusia.
Kehadiran antibodi penetral (NAb) yang sudah ada sebelumnya terhadap kapsid AAV dapat memicu respons imun, yang membatasi kelayakan pasien untuk terapi gen. Para peneliti menemukan bahwa 44% sampel serum manusia dengan NAbs yang sudah ada sebelumnya untuk AAV3B memiliki titer NAb timbal balik 5-20 kali lipat lebih rendah untuk AAV3B-V04.
“Kami menyimpulkan bahwa calon varian AAV3B-V04 yang dijelaskan di sini lebih unggul dari kapsid AAV3B induknya,” kata para peneliti. “AAV3B-V04 memberikan keuntungan berbeda seperti peningkatan efisiensi transduksi, tropisme jaringan, dan pengurangan imunogenisitas.”
“Hati tetap menjadi target utama untuk terapi gen, tetapi kegunaan terapi gen berbasis AAV masih dibatasi oleh dosis vektor yang relatif tinggi yang diperlukan dan oleh respons imun yang sudah ada sebelumnya,” kata Pemimpin Redaksi Terence R. Flotte , MD, Celia dan Isaac Haidak Profesor Pendidikan Kedokteran dan Dekan, Rektor, dan Wakil Rektor Eksekutif, University of Massachusetts Chan Medical School. “Setiap kapsid AAV baru yang dapat meningkatkan potensi vektor dan memungkinkannya menghindari antibodi serum yang sudah ada sebelumnya bisa menjadi sangat signifikan.”
Informasi lebih lanjut: Jyoti Rana et al, Karakterisasi Varian Kapsid AAV3B yang Direkayasa Secara Bio dengan Peningkatan Tropisme Hepatosit dan Penghindaran Kekebalan Tubuh, Terapi Gen Manusia (2023). DOI: 10.1089/hum.2022.176
Disediakan oleh Mary Ann Liebert, Inc
Kutipan: Bioengineering vektor virus terkait adeno yang lebih baik untuk terapi gen (2023, 25 April) diambil 25 April 2023 dari https://medicalxpress.com/news/2023-04-bioengineering-adeno-associated-virus-vector-gene. html
Dokumen ini tunduk pada hak cipta. Terlepas dari kesepakatan yang adil untuk tujuan studi atau penelitian pribadi, tidak ada bagian yang boleh direproduksi tanpa izin tertulis. Konten disediakan untuk tujuan informasi saja.